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起发 Ec UDG酶
2026-01-27 21:44  浏览:3
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  Ec UDG酶产品描述
UDG酶可催化水解含有尿mi啶的DNA链的尿mi啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键,释放游离尿mi啶。本尿mi啶DNA糖基酶(UDG)来源于大肠杆菌ung基因,经重组表达与多步蛋白纯化而得。该酶分子量为25KDa,催化含尿mi啶的单链和双链DNA释放游离尿mi啶,对RNA无活性。
UDG酶常用于止防止PCR扩增产物的交叉污染,其作用原理基于:在PCR反应中以dUTP替代dTTP掺入DNA中,形成了含dU碱基的PCR扩增产物,UDG能选择性断裂单链和双链DNA中U碱基的糖苷键,降解PCR扩增产物,消除上轮扩增产物对新样本的污染问题。由于大肠杆菌UDG经高温失活,降温到低温后,活性会部分恢复;因此不建议本酶用于防止PCR扩增产物的交叉污染。建议利用本公司的热敏UDG(目录号AE0402)进行防止PCR扩增产物的交叉污染。
Ec UDG酶产品应用
主要应用于PCR扩增产物的防污染。它的作用原理基于:在PCR反应中以dUTP替代dTTP掺入DNA中,形成了含dU碱基的PCR扩增产物,UDG能选择性断裂单链和双链DNA中U碱基的糖苷键,降解PCR扩增产物,消除上轮扩增产物对新样本的污染问题。
活性定义
37℃反应条件下,每分钟催化60 pmole尿mi啶碱基从含尿mi啶的双链DNA上释放所需要的酶量为1 U。
质量控制
无内切酶活性:50 U的本酶和1μg的pBR322 DNA在37℃下反应2小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
运输与保存
干冰运输。-20℃保存,有效期2年。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作!
本产品主要用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
备注
长期储存(非频繁使用;每月1-2次):-70℃;每天或每周使用:-20℃。尽量避免多次冻融,切勿暴露在温度波动较大之处。温度波动对产品的稳定性有极大影响。
UDG可以在PCR反应前清除不慎污染的U-DNA分子,对于某个PCR扩增反应,整个实验室必须在所有的PCR反应中添加dUTP,使所有扩增产物都成为U-DNA。如仅某次PCR扩增反应使用dUTP,T-DNA仍积累,这个抗污染系统也难以起到wan全的作用。
UDG/dUTP系统是PCR试剂专用的一种防污染措施,为了防止PCR产物的污染,尤其是在临检实验室中反复扩增同一片段时,必须严格规范实验室的区域划分和操作。
如果经过换房间、紫外照射、DNase消化等措施后,依然对某个片段存在污染,建议在不同的扩增区重新设计引物,以错开污染片段。
大肠杆菌UDG酶的反应温度可以在37℃-50℃的范围内变化,建议在37度反应,也可根据实验需要在37-50℃范围内自由调整反应温度。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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联系方式
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状态:在线 发送信件
姓名:黄先生(先生)
电话:83189349
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