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荧光定量PCR校准
荧光定量PCR校准从PCR仪名称、原理、计量特性、计量校准条件、PCR检测仪温度校准、计量校准结果、计量周期七个方面做阐述。
一、名称
PCR仪（Polymerase Chain Reaction analyzer）是一种DNA聚合酶在温度场条件下使特定基因片段发生快速扩增的仪器。主要应用于基础科学研究、疾病研究、临床医学诊断、出入境检验检疫、环境监测、药物研发等领域。
二、基本原理
PCR仪主要由控制系统、电源系统、温控系统、检测系统和电源部件组成。其基本原理为：加了使双链DNA解开螺旋，在退火温度条件下引物同模板DNA杂交，在Taq DNA聚合酶，dNTPs,Mg2+和合适pH缓冲存在条件下延伸引物，重复“高温多变性（90-95）℃-适温延伸（70-75）℃"过程，使得测样本中的核酸呈指数级扩增，PCR仪工作的关键是温度控制。
三、计量特性
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项目 |
定型PCR仪 |
定量PCR仪 |
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温度示值误差 |
+ |
+ |
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温度均匀度 |
+ |
+ |
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平均升温速率 |
+ |
+ |
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平均降温速率 |
+ |
+ |
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样本示值误差 |
- |
+ |
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样本线性 |
- |
+ |
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注：+为校准项目；-为非校准项目 |
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四、荧光定量PCR校准计量校准条件
仪器使用允许的环境条件，测温过程中应测量和记录环境的温度、相对湿度。
1、环境条件：温度（15-30）℃；湿度（10%-75%）RH
2、校准设备：PCR温度校验仪 JDPC-96；内置15个温度监控探头，探头材质为紫铜作为温度传导载体；温度传感器、温度反应迅速灵敏，测温精度小于0.1℃（中国计量规程精度为0.15℃）。
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